临床检验方法与仪器 第一部分作业
- 列表归纳紫外-可见分光光度计、荧光光谱分析仪、原子吸收光谱仪、原子发射光谱仪的原理、特点、技术优势和主要应用对象;
- 调研新型光谱仪,每一类至少提供1个例子,列出图片、厂家、型号、主要技术特点和优势。
光谱分析仪器与技术的总结与归纳
紫外-可见分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)
紫外-可见分光光度计是一种用于测量样品吸收紫外线或可见光的仪器,通过它所测定的吸光度来分析样品中特定化合物的浓度。
原理:
- 光源:紫外-可见分光光度计使用光源(通常是氘灯用于紫外区域,钨灯用于可见区域)发射光线。
- 单色器:单色器用于选择特定波长的光。光通过单色器时,仅一定波长的光能通过。
- 样品室:选定波长的光进入含样品的比色皿。样品分子吸收某些波长的光,导致光强度削减。
- 检测器:未被吸收的光最后会达到检测器,检测器测量通过样品后的光强度。
- 读数输出:基于通过样品的光有多少被吸收,检测器输出一个与样品中特定化合物浓度相关的值。
特点及技术优势:
- 简便性与效率:UV-Vis分光光度计操作简单,能快速提供结果,适合快速样品检测。
- 灵敏度高:可以准确测量非常低的吸光度变化,用以检测低浓度的样品。
- 范围广泛:能够覆盖200到800纳米波长范围,适用于多种类型的样品。
- 定量与定性分析:不仅可以定量分析样品中的化合物,还可以通过光谱特性进行定性分析。
主要应用对象:
- 化学分析:用于检测和量化溶液中的化学物质,如金属离子、有机化合物以及生物大分子等。
- 环境监测:水和空气样本中污染物的检测。
- 医学与临床:用于测定生物样本中例如血液、尿液中的特定生化成分。
- 食品工业:检测食品中的色素、防腐剂及营养成分等。
- 药物分析:在药品制造中用于质量控制及成分分析。
荧光光谱分析仪(Fluorescence Spectrophotometer)
荧光光谱分析仪是基于荧光和磷光测量的仪器,广泛应用于具有荧光性质物质的检测。它通过测定样品在激发光作用下所发出的光的强度和波长,用于分析样品中特定成分的性质和浓度。
原理:
- 激发光源:荧光光谱仪使用特定波长的光源(如氙灯、LED或激光)来照射样品。
- 样品激发:当荧光分子吸收这些光子后,从基态(最低能级)跳至激发态(较高能级)。激发态的寿命非常短暂,通常在几纳秒到几微秒。
- 发射荧光:当激发态的分子回到基态时,会释放出能量,通常以荧光的形式发射出来。荧光的波长通常比激发光的波长长,这种现象称为斯托克斯位移。
- 检测与分析:荧光的强度和其波长被检测器(例如光电倍增管)记录,光谱仪会分析这些数据,与标准曲线相比较,从而计算出样品中特定化合物的浓度。
特点与技术优势:
- 灵敏度高:荧光光谱法因其极高的灵敏度而被广泛应用,能够检测到极低浓度的物质(皮克摩尔级别)。
- 选择性强:通过选择不同的激发和发射波长,可以非常精确地选择性地检测特定的化合物。
- 速度快、效率高:测量快速且样品准备简单,适合高通量分析。
- 非破坏性:样品在测量过程中不被破坏,适合珍贵样品的分析。
主要应用对象:
- 生物医学研究:用于蛋白质和核酸的定量分析,细胞标记和追踪,以及生物分子间相互作用的研究。
- 临床诊断:检测血液或尿液中特定的生物标志物,如维生素、激素和病理状态下的分子。
- 环境监测:用于检测水体和土壤中的有机污染物和荧光指示物。
- 食品工业:分析食品中的添加剂、维生素或污染物。
- 药物开发:用于药物发现中的药效和代谢研究。
原子吸收光谱仪(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)
原理:
原子吸收光谱仪广泛用于检测样品(尤其是液体样本)中的金属元素。该技术基于金属原子吸收特定波长的光以量化元素含量的原理。
- 样品制备和雾化:首先将样品溶解在适当的溶剂中,然后使用雾化器将液体样品转化为气溶胶。
- 原子化:气溶胶引入到高温火焰或石墨炉中,高温使样品中的金属元素蒸发并形成原子蒸气。
- 光吸收:光源(通常是中空阴极灯,每个元素一种专用灯)发射出特定波长的光,该光束穿过原子化的样品。由于各元素的原子结构不同,每种元素仅吸收特定波长的光。
- 检测:通过检测器(通常是光电倍增管)测量未被吸收的光的强度。吸收的光越多,说明样品中相应金属元素的含量越高。
特点与技术优势:
- 高灵敏度:原子吸收光谱法能检测到非常低浓度的元素,灵敏度可达ppb级别。
- 高选择性:每种元素都有其特定的吸收线,因此AAS具有极高的元素选择性,可以精确测定特定元素而不受其他元素的干扰。
- 广泛的应用范围:几乎所有的金属元素均可通过调整光源和分析条件进行测量。
- 稳定且可重复:结果稳定可靠,适合常规实验室的重复性需求。
主要应用对象:
- 环境科学:测定水体、土壤和废物样本中的重金属污染,如铅、汞和镉等。
- 临床实验室:分析血液和尿液中的痕量金属,如铜、锌等,对于诊断某些疾病和状况十分重要。
- 食品安全检测:测定食品和饮用水中的金属含量,确保达到食品安全标准。
- 工业监测:在矿业和金属加工行业中,监控和控制金属的纯度和含量,保证产品质量。
- 药品分析:在药品生产中检测原料的金属杂质,确保药品安全有效。
原子发射光谱仪 (Atomic Emission Spectrometer, AES)
原子发射光谱仪是一种分析技术,用以测定样品中的元素组成。这种技术特别适用于量化金属元素的浓度,并可应用于非金属元素的检测。
原理:
原子发射光谱分析基于元素在受到足够能量激发时,其原子或离子从较高能级跃迁至较低能级并发射光子的原理。这些光子的波长具有元素特异性,通过分析这些发射线的强度,可以确定样品中元素的浓度。
- 样品准备与激发:样品首先被转化为气态原子或离子,这一过程通常在等离子体源(如感应耦合等离子体 ICP 或直流等离子体 DCP)中完成。等离子体是一种含有高能电子和离子的气体,可以有效地激发样品中的原子。
- 光子发射:原子或离子在激发后返回到低能态,过程中释放出光子。每种元素的原子发射线具有独特的波长,这些波长对应于元素的电子能级差。
- 检测与分析:发射出的光束被色散元件(如棱镜或光栅)分离,根据其波长进行识别和测量。光信号的强度(即光子数量)与样品中相应元素的浓度成正比。
特点与技术优势:
- 多元素同时分析:AES可以同时测定样品中多种元素的浓度,非常适合复杂样品的分析。
- 高元素覆盖范围:几乎可以检测所有元素的浓度,包括金属和非金属。
- 高灵敏度与准确性:感应耦合等离子体(ICP-AES)尤其具有极高灵敏度,可达ppb(十亿分之一)水平。
- 适用于不同状态的样本:固体、液体甚至气态样本经适当处理后均可用于分析。
主要应用对象:
- 环境监测:测定水质、土壤及大气中的金属含量,如监测重金属污染。
- 工业应用:金属加工行业用于材料中元素成分的精确测定,以及在矿产勘探中分析矿石的元素组成。
- 食品与农业:检测农作物及食品中的矿物质含量和污染物,例如检测农药残留和食品包装中的元素迁移。
- 生物医学研究:用于测试生物样本(如血液、尿液)中的矿物质和微量元素水平,这对理解各种生物学和病理过程至关重要。
新型光谱仪的调研
吸收光谱分析仪器
参考网址:
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/912A0760
厂家:
Thermo Fisher Scientific
型号:
Thermo Scientific iS50 FTIR Spectrometer
主要技术特点和优势:
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高灵敏度和高光谱分辨率:
- 采用专利的动态对准技术,确保长期的光学性能和极高的灵敏度。
- 配备高性能的傅立叶变换红外(FTIR)干涉仪,可提供高达0.09 cm-1的光谱分辨率。
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模块化设计,灵活多样的应用:
- 独特的模块化设计允许用户轻松切换不同的采样配件,适应不同的应用需求。
- 可与显微镜、TGA、GC/MS等其他分析技术联用,扩展分析能力。
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直观的软件界面,简化工作流程:
- 搭载直观的OMNIC软件,具有强大的数据处理和分析功能。
- 内置大量的谱库,方便用户进行光谱解析和化合物识别。
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稳定可靠的性能:
- 采用密封和干燥的光学系统,最大限度地减少环境因素的影响。
- 配备自动诊断和校准功能,确保仪器的长期稳定性和可靠性。
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广泛的应用领域:
- 适用于制药、高分子材料、食品、环境等众多领域的研究和质量控制。
- 可用于分析固体、液体、粉末、薄膜等多种样品类型。
发射光谱分析仪器
参考网址:
https://resources.perkinelmer.com/lab-solutions/resources/docs/BRO_Avio-500-ICP-OES-English_013415_01.pdf
厂家: PerkinElmer(美国)
型号: Avio 500
主要技术特点和优势:
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PlasmaShear技术:这项专利技术可以有效去除等离子体尾焰中的冷原子区域,从而最小化了基体效应,提高了结果的准确性和重现性。
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双视图光学系统:同时提供轴向和径向两种等离子体观察模式,兼具高灵敏度和宽动态线性范围。
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同时背景校正:在分析受谱线干扰的元素时,Avio 500 能够同时测定分析线和背景,显著提高了复杂基体样品分析的准确性。
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高分辨率光栅系统:配备了高密度光栅,提供优异的谱线分辨率,可有效消除谱线重叠干扰。
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垂直炬管设计:采用不锈钢垂直炬管设计,有效减少了基体沉积和进样效应,延长了炬管使用寿命,提高了分析速度和通量。
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Flatfield光源:内置Flatfield参比光源,实时监测和自动补偿光学系统的漂移,确保长期分析结果的一致性和准确性。
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Syngistix软件平台:集成了智能化质控、审计跟踪、方法开发助手等多项功能,方便用户进行仪器控制、方法优化和数据管理。
散射光谱分析仪器
参考网址:https://tsi.com/products/particle-sizers/supermicron-capable-particle-sizer-spectrometers/laser-aerosol-spectrometer-(las)-3340a/
厂家:TSI Incorporated
型号:Laser Aerosol Spectrometer 3340A(3340A型激光气溶胶光谱仪)
主要技术特点和优势:
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宽粒径测量范围:可测量0.09至7.5微米范围内的颗粒,满足大多数应用需求。
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高分辨率:在整个测量范围内可提供高达99个粒径通道,确保精确分辨颗粒大小分布。
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高浓度测量能力:即使在高达每立方厘米4000个颗粒的高浓度下,仍能保持单颗粒计数和粒径测量的高精度。
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快速采样和响应:采样频率可达1 Hz,实时反映气溶胶浓度和粒径分布的变化。
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便携式设计:重量轻,体积小,内置电池,方便现场测量。
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环境适应性强:可在0°C至50°C的温度范围内工作,适应各种环境条件。
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内置数据存储与通信接口:具有10 MB的数据存储空间,可通过以太网或USB接口实现数据传输和远程控制。
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专业软件支持:配备Aerosol Instrument Manager®软件,提供实时数据显示、分析和报告生成功能。
该光谱仪利用散射光谱分析技术,通过测量单个颗粒散射光的强度分布,实现对气溶胶粒径分布的精确表征。它在大气环境监测、室内空气质量评估、纳米材料研究等领域有广泛应用。
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参考文献:
[1] 樊绮诗,钱士匀, 贺志安, 等. 临床检验仪器与技术[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2015.